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Funakoshi新产品----AllView PAGE Buffer

时间:2020-01-03 作者:市场部 文章来源: 浏览:505

AllView PAGE Buffer是一种新型的SDS-PAGE蛋白电泳缓冲液。这款缓冲液具有一个显著的特点就是能够在碱性的Laemmli凝胶(Tris-HCl)中分离不同分子量大小的蛋白质,类似于梯度凝胶的使用。建议使用丙烯酰胺浓度为6%的分离胶和3%的浓缩胶,以分离分子量约在10 kDa250 kDa的范围的蛋白。电泳后的聚丙烯酰胺凝胶可直接用于CBB染色、银染或western印迹。


产品特点:

1. 节省成本和时间(不需要梯度凝胶

2。 使用mini gel只需13分钟即可完成电泳

3. 适用于之后进一步的分析实验:例如CBB染色、蛋白质印迹等

 

操作步骤:

1. 用超纯水将20×AllView PAGE Buffer稀释至工作液。(例如,取25 mlAllView PAGE Buffer475 ml 的超纯水中.

2. 将凝胶放入电泳槽中。

3。 1×AllView PAGE Buffer注入电泳槽中。

4. 点样以及加入蛋白marker

5. 开始电泳电泳条件设置如下。


Gel Voltage Time
Mini gel (8 × 10 cm, 1 mm thick) 250 V (Constant voltage) 13-15 min


注意:

AllView PAGE Buffer适用于Laemmli凝胶(见下文推荐用法)。

如果使用预制凝胶,则最佳丙烯酰胺浓度可能不同。

AllView PAGE Buffer不可重复使用。

AllView PAGE Buffer20×原液。使用前请稀释至1倍工作液。

如果观察到SDS沉淀,使用前将其放在水浴(约37°C)中使其完全溶解。

最佳电泳时间取决于丙烯酰胺浓度、凝胶大小和电压。

建议使用MW Marker作为标记。(e.g. DynaMarker® Protein MultiColor Stable II, Code#DM660).

 

推荐用法:

建议丙烯酰胺的浓度为6%的分离胶和3%的浓缩胶,以分离分子量大概10 kDa250 kDa范围的蛋白。特别是在需要分离低分子量蛋白质(10kda~30kda)的情况下,建议使用10%的分离胶。

1. 准备胶 (Laemmli’s method)  

1,聚丙烯酰胺分离胶和浓缩胶配方(2 mini gels

 

Stacking gel (6 ml)

Resolving gel (15 ml)

Gel percentage

3%

6%

10%

Ultrapure water

3。9 ml

8。05

6.05

1。5M Tris-HCl (pH8。8)

1。5

3.75

3.75

30% Acrylamide/Bis solution

0.6

3.0

5.0

10% SDS

0.06

0.15

0.15

TEMED

0.003 (3 µl)

0.00375 (3.75 µl)

0。00375(3。75 µl)

10% APS

0.06

0.05

0.05

 

上图为 DynaMarker® Protein MultiColor Stable II, Code#DM660

 

2.电泳图

AllView PAGE BufferLaemmli electrophoresis running bufferTris-Glycine-SDS)的使用区别在于蛋白质迁移率不同。通过对AllView PAGE BufferLaemmli gelTris-HCl)的结合使用,可以像梯度凝胶一样分离大范围的蛋白质大小,如下图。

 

订购信息

货号

产品名称

规格

DS520

AllView PAGE Buffer

500 ml (20 × stock solution)

 


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